Hieff NGS^® DNA Library Prep Kit是针对Illumina^®和MGI^®高通量测序平台专业开发设计的新一代建库试剂盒。本产品采用高质量的酶学组成，在前一代建库试剂盒的基础上，改进了DNA片段末端修复和加A效率，同时改善了接头连接效率。本试剂盒采用新型的高保真酶，显著提高扩增均一性和保真性，可应用于常规动植物基因组、微生物基因组、FFPE、cfDNA、ChIP DNA等样本，助力获得优异的测序数据。

1. 适用100 pg-1000 ng所有DNA样本，包含cfDNA、FFPE等
2. 业界领先的文库转化率，最高可达70%以上
3. 多样本验证可获得优异的文库与测序数据
4. 严格的批次性能与稳定性质控

1. gDNA不同投入量建库产量对比

与竞品试剂盒相比，13577ES对常规gDNA样本建库的产量更高。

2. cfDNA不同投入量建库产量对比

与竞品试剂盒相比，13577ES对cfDNA真实样本建库的产量明显偏高

3. FFPE不同投入量建库产量对比

与竞品试剂盒相比，13577ES对FFPE样本建库的产量偏高；尤其针对低质量、低投入量FFPE样本，13577ES产量有较为明显优势。

4. 肿瘤标准品建库产量对比

与竞品试剂盒相比，13577ES对多种肿瘤标准品在不同投入量下样本建库的产量均偏高。

5. 肿瘤标准品建库捕获数据对比（gDNA突变）

与竞品试剂盒相比，13577杂交捕获后数据Duplication较低、自连率较低；对于gDNA常见基因突变位点（0.1%突变频率）的检出率与竞品相当。

-25~-15 °C保存，有效期1年。

box 1 -25~-15 °C保存，box2 2~8°C保存。有效期1年。

Q:gDNA 片段化参考说明书酶切条件酶切 20 min，竟然切不动？

A:一般优先考虑 DNA 的质量问题，比如 Input DNA 中引入高浓度金属离子螯合剂或其他盐离子，可能会影响酶切效果，建议将 DNA 稀释在 ddH2O 或不含 EDTA 的10 mM Tris Buffer (pH 7.5-8.0)中再进行片段化。其次，如果样本是反转录得到的全长 cDNA，则需考虑样本纯度问题。另外，对于环状DNA 的酶切，需要另行摸索酶切时间体系。特殊样本可考虑磁珠纯化之后进行酶切或适当延长酶切时间。

Q:酶切时间也不长，竟然过度酶切了?

A:以插入片段 300 bp 为例，白细胞 gDNA，30 度酶切 10min，出现如下图过度酶切现象。建议参考酶切条件需要考虑不同样本 gDNA 大小，如白细胞 gDNA 较小，应适当缩短酶切时间，否则易出现如下过度酶切现象。

Q:酶切法建库，如何做到较好的质量控制？

A:1）文库浓度检测，qubit 法或qPCR ； 2）文库长度检测，琼脂糖凝胶电泳测定；

   2）文库质量鉴定，Agilent 2100/2200；

   3）文库大小分布、引物二聚体和过扩增产物的缺失，应通过电泳方法进行确认.构建优异的DNA 文库，除了明确以上因素之外，还需要选择高质量的建库产品。翊圣生物为满足广大科研工作者的 NGS 建库实验需求，推出了 NGS 建库整体解决方案， 方便大家根据实验需求进行选择。