本试剂盒是利用拓扑异构酶(Topoisomerase)高效快速连接DNA片段的原理进一步研发而成，与传统的T4连接酶相比，具有以下优势：

1）快速，仅需 1-5 min即可完成连接反应。

2）高效，无自连，阳性克隆率接近100%，无需设置蓝白斑筛选；

3）操作简单，从连接到涂板仅需 15-20 min。操作过程省去冰浴、热激和1 h复苏。

4）可连接长达5 kb目的产物；

5）Hieff Clone^® Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit不含多克隆酶切位点(MCS)，在引入后续酶切位点进行酶切操作时，不会受到MCS位点的影响，从而增加酶切效率以及克隆成功率。