Reactive Oxygen Species Assay Kit 活性氧(ROS)检测试剂盒
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Q:使用范围?

A:该试剂主要是检测动物活细胞内的活性氧水平,对于植物可以在制备原生质体后进行检测使用,该试剂盒不能检测体内的活性氧试剂。

Q:如何稀释?

A:无血清培养基、HBSS或是PBS等缓冲液进行稀释,稀释后不稳定建议现配现用。

Q:探针颜色?

A:绿色荧光。

Q:.如何避免过高的荧光背景?

A:探针孵育后,一定要洗净残余的未进入细胞内的探针,再检测荧光信号,否则会导致背景较高。

Q:探针一般孵育多长时间?

A:37℃细胞培养箱内避光孵育30min。

Q:可以检测组织吗?

A:该试剂主要是检测动物活细胞内的活性氧水平,因而不能检测组织切片,对于活体组织内的检测没有验证过,尽量参考文献,如果是将活体组织分散成单细胞进行检测并保证细胞的活性也是可以的。

Q:检测仪器?

A:荧光显微镜、共聚焦显微镜、酶标仪、流式细胞仪

Q:可以检测正常细胞中的活性氧的含量吗?

A:正常细胞中活性氧含量很低,该试剂无法检测正常细胞中活性氧的含量

Q:我用的是同一支探针,未分装,前 5 次都可以染上颜色,而且荧光信号很好, 这次没有染上颜色?

A:大致有以下3个原因:1.细胞状态不好,导致染色效率低;2.阳性药物诱导时间过短,一般 37℃ 避光孵育 30 min-4 h 可显著看到活性氧水平提高;3.这个探针反复冻融 4 次以上,探针性能会不稳定,染色效率降低,以及荧光信号不稳定(时强时弱、易猝灭)。建议拿到探针后,分装避光保存在-20 C 冰箱中,避免反复冻融。

Q:活性氧检测试剂盒,这个试剂盒,我检测出了荧光值,怎么作图?荧光值和ROS值之间是否有换算公式?

A:是不需要换算成ROS值。横坐标应该就是您实验组和正常组。

Q:平均荧光强度怎么反应ROS水平?

A:实验组平均荧光强度与正常组相比高,而且有显著性差异,就说明活性氧升高。或者您用流式检测的话是用峰图表示。

 

 

Q:如果是酶标仪检测,测得的峰值一般怎么进行对比?实验组和对照组的荧光值?是作图吗?

A:实验组平均荧光强度与正常组相比高,而且有显著性差异,就说明活性氧升高。是做统计图一般柱状图。

Q:那流式可以又荧光峰值的偏移对吗?

A:是的,流式是用峰值的偏移来表示结果。

 

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