Q: 腔肠素溶液如何配制?
A: (1)腔肠素溶液配制方式来源文献,仅供参考,具体工作浓度建议参考文献做梯度摸索最佳浓度。 母液:称取 1mg 腔肠素粉末直接溶解于 197µl 酸化的甲醇溶液( 100% 甲醇中含有 20µl/ml 3M 或者 6M HCl),配制成 12 mM (~5mg/ml,5×) 的腔肠素储存液。 工作液:如体外:10 的 5 次方的细胞数可用 10 μ M 。
Q:腔肠素的发光特性如何?
A: 体外:细胞孵育 10-15min 后,立即检测。 体内:可在注射后 10-15 min 内检测。
仅供参考,建议预实验建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。
Q:是否能用于活体成像?
A: 一般用于体外,因为容易氧化,体内的话要注射和麻醉,时间久,体外检测快,不影响。体内的话推荐即用型。
Q:推荐仪器?多功能酶标仪能用吗?
A: 推荐仪器:具有生物化学发光检测模块。荧光素产生的光可以被光度计或闪烁计数器检测。常见的活体成像仪器:如 IVIS® Lumina 小动物活体成像系统,德国 Bruker 公司的 In-Vivo Xtreme 多模式小动物活体成像仪。多功能酶标仪:需要和仪器厂家确认是否具体生物化学发光检测模块。注:不能用荧光显微镜。
Q:说明书写到的配置储存液用的丙二醇是1,2-丙二醇吗?乙醇是无水乙醇吗?
A: 是的,丙二醇是1,2-丙二醇,乙醇是无水乙醇。