Coelenterazine Native 天然腔肠素
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天然腔肠素(Coelenterazine native),又称腔肠素游离酸,是海肾荧光素酶(Rluc)和Gaussia荧光素酶(Gluc)等多种荧光素酶的作用底物,也是水母发光蛋白的辅助因子,应用非常广泛,可用于检测活细胞中钙离子浓度,基因报告分析,BRET(生物发光共振能量转移)研究,ELISA,HTS,以及组织或细胞中ROS水平的化学发光检测。

FAQ

Q:腔肠素作用原理?

A:腔肠素可作为许多荧光素酶的底物,比如海肾荧光素酶(Rluc),Gaussia 分泌型荧光素酶

Gluc),以及包括水母发光蛋白(aequorin)和薮枝螅发光蛋白(Obelia)在内的光蛋白

Photoproteins)。其发光原理是:以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下,氧化腔肠素,产生高能量的中间产物,并在此过程中发射蓝色光,峰值发射波长约为 450~480 nm。

Q:腔肠素溶液如何配制?

A:腔肠素溶液配制方式来源文献,仅供参考,具体工作浓度建议参考文献做梯度摸索最佳浓度。母液:称取 1mg 腔肠素粉末直接溶解于 197µl 酸化的甲醇溶液( 100% 甲醇中含有20µl/ml 3M  或者  6M HCl),配制成  12 mM (~5mg/ml,5×) 的腔肠素储存液。 工作液:如体外:10 5 次方的细胞数可用 10 μ M 。

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