Q:病毒 4℃孵育过夜离心后,没有看到沉淀,打算继续孵育到晚上,4℃孵育这个时间可以延长多久?现在来不及做可以再放到晚上吗?有没有最适合的孵育时间建议?
A:4℃孵育的时间放可以延长,吸附的病毒量可以增大,不过同时也会增加吸附杂质的比率,孵育时间可以参考说明书的建议范围。
Q:慢病毒浓缩试剂盒,在 4℃混匀孵育每隔 30min 摇晃混匀一次的这一个步骤,是不是放在 4℃混匀仪上摇晃效果更好?
A:一直摇晃混匀会影响吸附效果,这个过程需要静置吸附的时间。
Q:慢病毒试剂盒大概成分是什么?浓缩效率高吗?2个10cm皿包的慢病毒,加这个浓缩液,能看到沉淀吗?
A:成分PEG,可提高100倍病毒滴度。至于沉淀有没有,要根据客户原始的病毒的总量。
Q:慢病毒浓缩试剂盒,能否去除血清中的BSA等杂蛋白?
A:无法去除杂蛋白,该试剂盒属于生物吸附-PEG浓缩,原理是聚合物沉淀法。
Q:Lentivirus Concentration Solution慢病毒浓缩试剂盒原理是什么?
A:含有聚乙二醇,具有高亲水性,在溶液中会吸收大量水分,减少病毒之间的距离,使病毒聚合在一起,提高病毒的相对浓度,达到沉淀浓缩的目的。
Q:我们的慢病毒浓缩液只针对慢病毒吗?是不是其他的逆转录病毒也可以?因为慢病毒本身就是逆转录病毒改造而成的?
A:慢病毒属于逆转录病毒科,其他逆转病毒也可以。
Q:它适用于其他病毒吗?可以作为通用病毒浓缩液吗?
A:虽然它属于逆转录病毒,但是病毒的整个大类其实很多,不能改成通用病毒浓缩液。
Q:产生的沉淀都是病毒码?
A:白色沉淀的多少并不代表病毒量的多少。白色沉淀中除病毒颗粒外,还有血清蛋白和少量的细胞碎片和基因组DNA等。去除方法,重悬病毒后,4℃ 12,000×g离心3-5min,吸取上清即为浓缩的病毒。