SulfoLink Coupling Agarose Resin是一类预活化的琼脂糖树脂，其纯化原理在于可以通过与巯基的反应实现抗原的固定化，进而利用抗原抗体的特异性反应对免疫血清中的抗体进行高效纯化，是多克隆抗体生产中不可缺少的纯化介质。

Q：该产品所采用的封闭液是什么？

A：50 mM Tris，5 mM EDTA-Na，50 mM L-半胱氨酸，pH 8.5。

Q：为什么柱子流速低？

A：可能是筛板被堵塞，建议清洗或更换筛板。

Q：为什么偶联液中蛋白或多肽沉淀？

A：可能是蛋白或多肽不溶，建议偶联液中加入＜30%的 DMSO 或DMF 或 6 M 盐酸胍促进样品溶解。

Q：为什么洗脱组分纯度低？

A：可能是树脂没有彻底清洗，建议增加结合/洗杂液体积。

Q：填料的偶联原理？

A：偶联原理如图，偶联液的要求是中性偏碱条件， 偶联后通过半胱氨酸上的巯基封闭剩余未偶联上蛋白的碘乙酸位点

Q：除洗脱液外均为碱性，在这里酸碱性的作用？

A：酸碱交替清洗去除偶联不牢的组分以减少后续纯化时配体脱落。

Q：偶联抗原之后可以重复使用，这个重复使用有没有次数的限制?

A：取决于抗原稳定性，抗原是蛋白还是多肽,一般可以用接近10次左右。用几次之后不结合抗体了说明不能用了。

Q：1）每mg抗原中TECP最大量添加量为12mg，在实验中如何确定TECP用量？

       2）抗原上的巯基位点有没有数量限制？

A：1）TCEP这个测试过已经是完全过量可以还原蛋白。如需调整TECP用量可以做几个浓度梯度对比还原后巯基的数量。

      2）没有限制。

Q：1ml试剂（0.5填料）能结合多少mg的抗原多肽？

A：1.5mg左右