Q:260/280 的比值只有 1.6 几?
A:若 OD260/OD280<1.6:有可能有蛋白质残留,氨基酸残基中的苯环在 280nm 处有吸收从而造成比值偏低,当然也有可能是其他苯环物质(酚类)造成的。可以用蛋白酶 k 进行处理;加入变性剂使蛋白变性。或者用氯仿进行抽提。
Q:19221 提取脂肪可以么?
A:脂肪这个不好提取,可以先离心后再过柱,样本用量不要过大,脂肪组织不好研磨。而且提取的浓度或者纯度不会好,推荐传统方式。
Q:样本用 trizol 裂解了,可以用这个吗?
A:可以,就是把 trizol 代替我们的裂解液,其他步骤不变。
Q:SPL 蛋白液有结晶析出。有影响吗?
A:没有影响,这是是胍盐析出,蒸发的问题,有析出说明饱和了。不影响。
Q:为啥试用装和正式的试剂盒 wash buffer 里加入无水乙醇的倍数不同,这会影响提取的浓度吗?
A:乙醇是用来沉淀核酸的,乙醇多的话容易把更多的核酸沉淀到膜上,即提取浓度会高些,但是相对的,wash buffer 的量是相对少的,这个组分是用来洗脱杂质的,它少了提取的纯度会不好。
Q:样本储存在trizol 里,还能用该试剂盒抽提吗?
A:可以,trizol 充当裂解液使用,其他步骤不变。
Q:LB buffer A2 和BD buffer A2有结晶析出。
A:这两个试剂中含有离液盐,将其放置37℃,晶体溶解后混匀再使用。
Q:说明书中写到可加β-巯基乙醇,加这个目的是什么?能不加吗?
A:用于变性Rnase,破坏二硫键,防止RNA降解。如果提取的RNA质量好可以不加。
Q: 这款提取产品有不适用的组织类型吗?
A: 高脂、高蛋白多糖、高纤维等样本不建议用本产品做提取,比如脂肪组织,脑组织,心脏组织,软骨组织等。
Q:19221和19211有什么区别?
A:19211是基于Trizol裂解和离心柱纯化的原理,适应于多种类型的样本,19221是柱式提取试剂盒,仅对细胞,组织进行提取
Q:19221和19231有什么区别?
A:19221是对于细胞和组织,19231仅针对细胞进行核酸提取。另外针对的细胞量不一样,19231适应于细胞数< 1×106情况,19221适合(5-10)×106个细胞。