Q：检测时样品的吸光度很低，和空白对照组差不多，这可能是什么原因？

A：首先确认一下标准曲线线性是否良好，确认没问题的话可以简单排除试剂盒和操作问题。吸光度低说明样品中的一氧化氮含量很低，可以通过增加标准品和样品的使用量至 60 微升， 其余试剂用量保持不变；或者把整个检测体系每种试剂的用量加大 50%，这样可以使检测灵敏度增加 50%。

Q：检测时发现每个样品的吸光值都差不多，值都很高，是检测试剂过量或者样品过量了吗？

A：考虑是否是培养基的影响，使用RPMI 1640 培养液时会发生这种情况，因为 RPMI 1640 培养液中含有高浓度的硝酸盐，会导致测得的吸光度都非常高。

Q：用这个试剂盒可以直接检测细胞上清的NO 含量吗？

A：一般细胞培养液中的NO 水平很低，除非是经典的NO 释放模型。所以我们建议检测细胞裂解液中的NO 水平。如果一定要检测细胞培养液，细胞培养时尽量少用一些细胞培养液，以浓缩NO。