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TRIeasyTM LS Total RNA Extraction Reagent 液体总RNA提取试剂(同TRIzol LS)
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Q:10606和19201的区别是什么?

A:19201是浓缩形式,需要的试剂用量更少一点,提取的准确性和提取反应的速度更快一些。一般10606就可以满足常规提取需求,如果客户想好更好的提取效果和rnase抑制效果可以用19201。

Q:RNA 降解?

A:(1) 组织样本保存不当。RNA 提取时要选新鲜组织或细胞样本,若为冻存样本,尽量避免反复冻融。样品离开活体或原来的生长环境后,样品中的内源RNase 开始降解 RNA,降解速度与内源 RNase 的含量及温度有关;(2) 投入样本较多,导致裂解不充分。试剂不能有效抑制样品中所有的 RNase;(3) RNA 保存时间过久,发生降解。对提取的RNA 进行纯度和完整度检测,分管在-80℃长期保存或在-20℃短期保存,尽快使用,避免反复冻融。

Q:是否有提 RNA 的层析柱?

A:没有。

Q:提取的 RNA 有基因组 DNA 污染?

A:(1) 向裂解液中加入氯仿后,需要在低温下(2-8℃)高速离心。离心后,RNA 被抽提到上层的水相中,中、下层是有机相,含有氯仿,DNA 即存在于中层。氯仿在常温下会与水以一定比例互溶,因此,常温离心会导致上层水相中也有少量基因组DNA 的污染。吸取上层液体时, 应非常小心,避免吸到中间层和下层;(2) RNA 样品中的少量基因组 DNA 残留,也可以通过后续逆转录反应前的基因组去除步骤进行去除。

Q:加入异丙醇离心后无沉淀?

A:RNA 含量可能较低。建议加入异丙醇后在 4℃或-20℃放置 10-30 min 后再离心。若依然看不见沉淀,在后面弃上清的操作时,采用吸取而不是倾倒的方法,以免沉淀丢失。

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