ArCas12a Nuclease (10 μM)
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ArCas12a核酸内切酶,源自Agathobacter rectalis细菌的CRISPR系统,别名Cpf1,是一个包含1263个氨基酸的单体蛋白。作为CRISPR/Cas系统的II类(V型)成员,ArCas12a仅由单一的效应蛋白行使功能,其特性与Cas9存在显著差异,例如靶向富含T的基序、不需要反式激活crRNA、DNA双链断裂产生粘性末端、参与RNA加工、具有DNA核酸酶活性等。
Cas12a缺乏HNH结构域,可单独利用其RuvC结构域在CRISPR RNA(crRNA)引导下识别位于靶标核酸5’端富含胸腺嘧啶(T)的PAM区而启动对靶标DNA的切割,已成功用于许多哺乳动物和植物的基因组编辑。此外Cas12a还具有反式切割活性,可不加选择地切割反应体系中的非靶标单链DNA。
与其它LbCas12a/AsCas12a相比,ArCas12a具有更高的温度适应性(25-55℃),可适用于基因组编辑及核酸检测等。
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