Q: 接头中 index/Barcode 组合原则是什么？

A: 碱基平衡，荧光平衡（详情可查看翊圣生物公众号微信软文“一文全面解析NGS 接头的奥秘”）

Q: 双端接头，连接过程的注意事项，长接头和短接头有区别吗？

A: 长接头带完整的 index 序列，所以接头连接的时候直接完成文库构建，此时如果文库浓度达到测序要求，那么可以直接PCR-Free 建库；短接头建库，接头连接步骤双端同时连接相同的 PE Adapter。