phi29 DNA polymerase来源于Bacillus subtilis噬菌体，经基因工程改造后具有卓越的链置换和持续合成能力，可合成长达70 kb的DNA片段。此外其3’→5’核酸外切酶校读活性较强，推荐体系中引物3’末端修饰以防止降解，常用于质粒的体外合成和全基因组合成。