Q：为什么样品不结合？

A：（1）样品的PH和盐浓度（与结合溶液一致），盐的含量一定要降低到电导5ms/cm以下（约为50 mM NaCl)；（2）PH选择的是否合适；（3）如果使用弱的离子交换，要充分平衡，一般要达到10CV以。

Q：为什么储存温度是-20℃，偶联配体后保存温度又是2-8℃？

A：未使用的产品保护液是异丙醇，可以在-20℃中保存不结冰，偶联蛋白后为考虑蛋白稳定性且反复冻融影响填料性能，选择2-8℃保存。

Q：为什么蛋白纯度不够？

A：（1）在不改变buffer条件下，在洗脱的步骤改为线性梯度洗脱，如果已经是线性洗脱，那么延缓梯度增加的速度，如原来10个CV拉到100%，现在改为20个CV拉到100%，梯度拉的越缓慢分辨率越高，但是相应的样品稀释度也会增加；（2）优化buffer条件，包括PH及盐的浓度和种类；（3）使用更高分辨率的产品；（4）采用其他不同的分离方法，例如分子筛，疏水层析。