Q:可以做体外吗？客户样本是组织。细胞样本可以吗？

A: 体外是可以，但是组织不可以，必须要保证能增殖，有DNA 合成。能进行增殖的细胞就可以。

Q: EdU 和Brdu 检测区别？

A: BrdU 免疫检测需要变性DNA 后才能与抗体结合，而 EdU 因为其特有的炔羟基团可以与一些荧光染料发生“Click”化学反应，无需变形，从而将细胞标记上荧光，因此应用更广泛。

Q:能否在活细胞中进行 Click-iT EdU 检测？

A: 不可以。虽然 EdU 是对活细胞进行代谢标记，但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型，检测信号时的Click 反应必须在固定和通透的样品上进行。

Q: 观测到较高的本底干扰，这是什么原因所致？如何减少本底干扰？

A: 叠氮化物和炔烃类间 Click 反应非常有选择性，生物体内几乎不可能有副反应发生，所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA 洗涤的次数。同时， 也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click 反应对照，以排除自发荧光干扰。此外，您还可在无 EdU 体系中进行完整的 Click 反应，验证Click 反应信号的特异性。