Q1：可以做冰冻切片吗？

A：可以。

Q1：多重染色的TSA, 第一个酪酰胺反应后怎么染下一个？

A：①抗体剥离:使用合适的 buffer 进行微波间断加热处理 10-15 min，buffer 可以使用 0.1 M 柠檬酸钠缓冲液 (pH 6.0)，也可以按照您的需要选择别的 buffer, 比如 Tris-EDTA Buffer (10mM Tris Base, 1mM EDTA Solution, 0.05% Tween 20, pH 9.0)。

②在室温下用 1×PBS 洗涤3 次，每次 5 min。每一轮染色结束后可通过荧光显微镜确认染色情况。

③从封闭(步骤 1) 开始进行下一个靶标的荧光免疫。