Hifair^® Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)基于Hifair^® Ⅱ Reverse Transcriptase而开发的即用型预混液。该酶的热稳定性大幅度提高，可耐受高达50℃的反应温度，适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时，该酶增强了与模板的亲和力，适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。

该预混液包含gDNA digester和2×Hifair^® Ⅱ SuperMix plus。gDNA digester可去除RNA模板中残留的基因组DNA污染，保证后续结果更加可靠。2×Hifair^® Ⅱ SuperMix plus含有逆转录反应所需的所有组分（Buffer，dNTP，Hifair^® Ⅱ Reverse Transcriptase，RNase inhibitor，Random primers/ Oligo (dT)₁₈ primer mix），只需加入RNA模板和 RNase-free ddH₂O即可进行逆转录反应，并同时终止gDNA digester的作用，保证cDNA的完整性。

该产品适用于两步法RT-qPCR检测，针对qPCR进行Random primers/ Oligo (dT)₁₈ primer的比例优化，使cDNA合成可从RNA转录本的各个区域起始，并具有相同的逆转录效率，最大程度保证了qPCR结果的真实性和可重复性。逆转录产物兼容SYBR^® Green和探针法qPCR，可以根据实验目的，选择UNICON^® qPCR SYBR^® Green Master Mix，Hieff^® qPCR SYBR^® Green Master Mix或Hieff^® qPCR TaqMan Probe Master Mix等试剂配合使用，进行高性能的基因表达分析。

Q：逆转录产品如何选择？

A：参考下表。

Q：逆转录引物如何选择？
 

A：11123ES中使用的是Random Primers和oligo dT按照一定优化的比例预混引物。
 

Q：反转录产物可以做普通PCR吗？
 

A：不推荐。11123ES以预混液形式提供，预混液中包含Oligo (dT)与Random Primers混合引物，逆转录产物反转均一，但长度较短，可以做短片段，过长的不适合。若反转录产物后续进行PCR，建议用翌圣11121ES，引物选oligo dT。
 

Q：逆转录产物后续进行qPCR，需要稀释吗？

A：建议稀释5-10倍。目的有二：一、提高稀释倍数，降低移液误差，提高实验重复性；二、降低逆转录体系中高浓度某些成分对下游qPCR反应的抑制作用。
 

Q：该产品可以搭配其他品牌的定量试剂使用吗？
 

A：可以。逆转录产物进行稀释后，反转录相关组分对后续不同品牌的qPCR试剂影响非常小。