Vaccinia Capping System
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真核生物中mRNA经转录后修饰可在5'端形成一个特殊结构,即帽子结构,该结构对mRNA的稳定、转运与翻译过程均有较重要作用。牛痘病毒加帽酶是催化形成帽子结构的有效酶,其由D1和D12两个亚基组成,兼具RNA三磷酸酯酶活性(TPase)、鸟苷酰基转移酶活性(GTase)和鸟嘌呤甲基转移酶活性(N7 MTase)。牛痘病毒加帽酶参与作用下的mRNA加帽过程如下图1所示,在mRNA 5'端添加一个7-甲基鸟嘌呤帽结构(m7Gppp),即为Cap0(图2)。

mRNA +1位核苷酸的核糖2’位羟基也可以甲基化,产物称为Cap1,人类的mRNA都具有Cap1结构。Cap1不仅与翻译起始有关,在针对外源RNA的先天免疫系统中,还可作为自身RNA的标志。2-O-甲基转移酶可以在mRNA +1位核苷酸的2´-OH位置处添加一个甲基基团,最终形成最有Cap1结构的mRNA(图3)。

该产品主要应用于RNA体外转录之后加帽,形成具有Cap1帽子结构的mRNA。

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