Q：检测准吗？巢式 pcr 什么意思？为什么要做两轮 pcr？

A：巢式 PCR 通过两轮扩增的方式，增加了产品的特异性和灵敏度，可以对 10 拷贝的支原体进行检测。

Q：GMyc-PCR 支原体检测试剂盒，能测细胞吗？细胞支原体测定方法是什么样的？

A：可以的，如果使用细胞悬液做样品，则需要提取DNA 后再进行 PCR。加入量一般为反应体系 1/10 的量或更少。

Q：对于同一个样品，为什么一步法恒温试剂盒检测结果为阳性，而 PCR 检测为阴性呢？

A：一步法恒温检测试剂盒检测的支原体的种类是 27 种，而 PCR 检测方法检测的是常见的 13 种支原体。样品中污染的支原体可能不包括在 PCR 法检测的支原体种类内。

Q：巢式 PCR 法和一步法恒温支原体检测试剂盒他们的优势在哪些方面，怎么选择？

A：PCR 法的灵敏度高于一步法检测，而一步法的灵敏度是 10^3 个拷贝才能检测出来。一步法检测的细胞支原体种类达 20 多种多于 PCR 法。

Q：GMyc-PCR 支原体检测结果如何判断？

A：GMyc-PCR 支原体检测方法通过巢式 PCR 的方式获得检测结果。整个实验由 2 轮PCR 组成，检测结果以第二轮为准。

Q：说明书中写的是不加loading buffer，直接点样就可以，我点样之后所哟有样品均没有条带（包含阳性对照），阳性对照加了loading buffeer才有条带。

A： 经确定客户配胶的时候未加入EB染料，他们的染料是加在loading buffer中的，所以不加入自己的loading buffer跑不出条带。

EB加入方式：

      1.如果配琼脂糖凝胶的时候加入EB染料，跑胶的的样品中不需要加入了

      2.如果配琼脂糖凝胶的时候未加入EB染料，跑胶的的样品中需要加入EB染料

Q：阳性对照是哪种支原体呢？

A：猪鼻子支原体