Q:sgRNA 的作用是基于什么原理?
A:在 RNA 编辑的过程中引导尿苷残基插入或缺失到动质体(kinetoplastid)中,属于一种小型非编码RNA,可与 pre-mRNA 配对。
Q:试剂盒提供的组分能直接用于合成sgRNA 吗?
A:试剂盒提供的是基于 T7RNA 聚合酶的转录反应体系,含有能被 Cas9 蛋白识别并起支架作用的特异性序列,该序列的一部分能与使用者设计的目标特异序列部分重叠,退火形成互补链后由DNA 聚合酶进行填充生成用于转录的 dsDNA 模板,使用者需要自己设计的特异性 DNA 序列。
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