革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法（属复染法），包括初染，媒染，脱色，复染等几步，主要用于区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

染色原理是：革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚，不含类脂，肽聚糖网层次较多且交联致密，经结晶紫初染和碘液媒染后能将结晶紫与碘的复合物牢固留在壁内，不容易被脱色液脱掉而仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁较薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。