Q:为什么柱子反压过高?
A:可能是样品中含高浓度的核酸,建议延长破碎时间直至粘度降低,或添加DNaseI
(终浓度为 5µg/ml),Mg2+(终浓度 1mM),冰上孵育 10-15min。
Q:为什么洗脱组分中无目的蛋白?
A:可能是表达量太低,建议优化表达条件,使用包涵体纯化缓冲体系。
Q:为什么上样过程中蛋白发生沉淀?
A:若蛋白发生聚集,建议在样品和所有缓冲液中添加稳定剂,如 0.1%Triton X-100 或 Tween-20。
Q:上样量一般是多少?
A: 具体上样量要根据填料的使用时间和载量, 该产品的载量为> 40 mg 6 × His-tagged protein/mL 基质。
400-6111-883