Q:为什么填料会呈现褐色?
A:缓冲液中含有DTT 等还原剂,适当降低还原剂 DTT 的浓度,或改用巯基乙醇。
Q:为什么在上样过程中蛋白发生沉淀?
A:可能是操作温度太低,建议在可在室温下进行上样。
Q:洗脱组分不纯(含多种蛋白)是什么原因?
A:可能是洗杂不彻底:建议增加Wash Buffer 体积;
Q:为什么洗脱组分中无目的蛋白?
A:可能是目的蛋白结合比较弱,在洗杂步骤中已被洗下来:提高 Wash Buffer 的pH 值,或者降低咪唑浓度。
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