Q：这款试剂盒是不是凋亡和周期均可以检测？

A：这款试剂盒是检测细胞周期的，细胞周期检测中细胞内的DNA被PI染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，根据DNA含量的分布情况，进行细胞周期和细胞凋亡分析。

Q：Staining Solution能否使用PBS或DPBS代替？

A：可以

Q：流式周期结果如何分析？G1,S，G2-M数据分析。G2/G1的数据是有意义吗？

A：一般是G1期数据都基本没有变化，抑制细胞周期的药物处理就是G2/M期增加，S期减少。一般是看各个时期的比值

Q：流式周期固定的时候能否直接加70-75%的乙醇重悬细胞固定？

A：不可以，如果直接用70-75%的乙醇，会导致固定效果差或者出现细胞固定后无沉淀的现象。建议先用PBS重悬细胞后，再加入无水乙醇稀释到70-75%。

Q：做流式周期的时候，只出现单峰是什么原因？是不是你们的试剂有问题？

A：试剂是没有问题的，能出现峰说明试剂是可以和核酸结合的，只出现单峰或没有G2期，可能原因有以下几点：1.细胞状态，是不是细胞状态较差，建议调整细胞状态之后进行实验。2.细胞密度过密，如果细胞接种的时候过密会导致细胞接触抑制。3.原代细胞，有些原代细胞是没有增值能力的。4.圈门没圈好，建议正确圈门

Q：流式分析细胞周期，收集了10的6次方细胞，但细胞在乙醇固定之后，还可以看到细胞沉淀的，但PBS洗涤两次之后，就基本没什么细胞沉淀了，上机发现看不到细胞了。这是怎么回事啊？怎么解决这个问题啊？

A：1. 先用冷PBS悬浮细胞，充分悬浮，使细胞充分分散成单细胞。之后缓慢加入预冷的无水乙醇，终浓度为70-75%乙醇。不直接加75%乙醇的原因是：直接加入乙醇会导致细胞团聚的现象，很难重悬成单细胞。乙醇固定之后没有细胞沉淀。

2.很可能是洗细胞的过程中丢失了，解决办法有：采用尖底的离心管和水平离心机。离心后尽量用吸管吸取上清，不要倾倒；吸上清时残留1mm左右的水膜，不要吸完。离心的转速或时间可稍微增加一点儿。每次加溶液时，吸头最好不要接触液面；混匀时最好不要用吸头吹打，以免吸头挂壁带走部分细胞。

Q：试剂盒的 RNase A和 PI的浓度是多少，Staining Solution成分是什么？

A:RNase A和 PI的浓度都是1mg/ml，Staining Solution成分是一些盐溶液配方，配方不告知，用完了可以暂用PBS替代。

Q：周期的各个时期加起来不足100%是什么原因呢？

A：应该是没调好，因为流式是一个动态的过程，首位有点偏差是正常的，差的大可能是圈了一些黏连的细胞，需要去掉这些细胞，或者选择不同的拟合公式，可以调整圈门看看。