Q:该产品会导致部分蛋白降解吗?
A:试剂 A 中含有 sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin 等多种抑制剂,有效抑制蛋白酶活性,最大程度地保持所抽提蛋白质的完整性;而且可以实现植物细胞、组织或原生质体样品总蛋白的提取。
Q:提取出来的蛋白可以用于后续 WB 实验吗?
A:可以的。除此之外,分离得到的蛋白组份可应用于 SDS-PAGE、Western Blot、免疫沉淀等。
Q:裂解植物后,产物中出现一小团透明胶状物,这正常吗?
A:植物在裂解后,产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA 等的复合物。在不检测和基因组DNA 结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白, 则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
Q:后续测定蛋白浓度可以使用BCA 吗?
A:可以的。也可采用我公司生产的蛋白质浓度定量试剂盒(20201ES)对提取样品中的蛋白质进行定量。